2018年1月份至6月份,广东永顺生物制药股份有限公司技术服务部从全国各地送检的204个猪场共629份样品当中,检测到蓝耳病病毒核酸阳性有98个猪场,一共171份样品,即蓝耳病病原阳性场的比例为48%(98/204),样品阳性率为27.2%(171/629),可见当前猪场的蓝耳病带毒排毒现象非常普遍。检测结果详细介绍如下: 参照GB/T 18090-2008 猪繁殖与呼吸综合诊断方法和GB/T 27517-2011 鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合RT-PCR方法,以及从NCBI下载蓝耳病病毒的基因(组)序列,分别针对N基因和gp5基因设计特异性引物,对全国各地猪场病料(含血清)中的蓝耳病病毒进行RT-PCR检测。其中,针对N基因(ORF7)的引物为:P1:5’-GCG GAT CCA TGC CAA ATA ACA AC-3’、P2:5’-AGC TCG AGT CAT GCT GAG GGT GA-3’,扩增片段为372bp。 2018年1月份至6月份蓝耳病病原样品阳性率统计见表1和图1,可见样品阳性率在14%至43.5%之间变化,平均不到四份样品中就有一份是蓝耳病病原阳性,可谓是“蓝天之下一片蓝”呀! 然而,蓝耳病病原阳性场的比例,又更高一些。2018年1月份至6月份蓝耳病病原阳性场的占比见表2和图2,差不多有一半猪场是蓝耳病病原阳性场。可见,蓝耳病病毒已经普遍在猪场里面“定居”,当中不排除有部分病毒是疫苗毒,毕竟蓝耳活疫苗免疫后也可以在血液以及组织器官里面存在一段时间。 将2018年1月至6月的蓝耳病病原阳性样品进行送样测序,成功测定了共142株蓝耳病病毒的gp5或N基因序列。应用DNAStar软件把该142株gp5或N基因序列和美洲型变异株、国内经典株、美国经典株、GM2类重组毒株以及NADC-30类毒株等相应的基因序列进行分析比较和分型,结果显示,变异株有56株,GM2类重组毒株有30株,NADC-30类毒株有53株,美国经典株有1株,其他(暂称为谱系8.X)2株,见表3和图3~图7。 |