猪轮状病毒病的危害与防治策略

一、流行病学与危害

轮状病毒(Rotavirus，RV)是引起多种幼龄动物以及婴幼儿腹泻的重要病原体。轮状病毒最早是Mebus在1969年从犊牛粪便中发现的，1973年澳大利亚科学家Bishop等在患有严重腹泻婴儿的十二指肠黏膜及粪便中发现了一种新的病毒粒子。在非洲和亚洲的撒哈拉以南地区，据调查超过三分之一的婴幼儿腹泻及胃肠炎疾病由轮状病毒引起，每年导致50万～60万婴幼儿死亡。欧洲和美国预防和治疗该类疾病的直接和间接医疗费用高达数10亿美元。自从1974 年英国Woode和Bridge首次从猪体分离出轮状病毒后，紧接着轮状病毒引起的仔猪腹泻相继被澳大利亚、北爱尔兰、美国、法国等国家报道，轮状病毒在猪中的传播被世界各国开始重视。中国自1982年从腹泻猪粪便中分离到RV，证实猪RV感染在我国普遍存在，至今已有24年。该病可以引起仔猪的死亡，成年猪的掉膘，饲料报酬的降低，增加人工费和药费的开支等。

二、鉴别诊断与实验室诊断

1、鉴别诊断

PRV发病仔猪主要表现为厌食、呕吐、严重腹泻，排水样粪便，部分严重脱水、酸碱平衡失调或继发感染而死亡。解剖可见小肠粘膜呈弥散性或条状出血、易脱落，肠壁变薄。组织学检查可见小肠绒毛萎缩、变短。临床上该病应注意与以下几种疾病进行鉴别诊断。

1）猪伪狂犬病 相似处：易感动物非常广泛，感染仔猪时主要表现腹泻，死亡率极高。不同处：该病是由猪伪狂犬病毒引起的。体温较高可达41度。病畜主要表现为神经症状，遇到刺激比较兴奋，流涎等。剖检可见鼻咽部、扁桃体水肿。

2）猪流行性腹泻 相似处：都易感染仔猪，发病率死亡率都较高。表现为消瘦，腹泻，粪便呈黄白色。剖检可见病变部位主要在胃肠，肠壁变薄。不同处：该病由猪流行性腹泻病毒引起。仅猪易感。剖检可见胃肠内有黄白色乳凝块!猪轮状病毒感染时肠内多为灰黑色。

3）猪传染性胃肠炎 相似处：大多冬季发病，各年龄段的猪都易感，尤以幼龄猪的死亡率高。腹泻，粪便呈黄白色。病变主要在胃肠道，肠壁变薄。不同处：猪传染性胃肠炎由猪传染性胃肠炎病毒引起。仅感染猪，呕吐，粪便呈黄绿色，较腥臭，含有乳凝块。剖检可见病变主要在胃肠部，胃内部分有溃疡，肠道内有灰黄色泡沫状液体。

4）仔猪黄痢 相似处：都主要感染仔猪，粪便呈黄色，病死率较高。肠壁变薄，胃内有乳凝块。不同处：黄痢由大肠杆菌引起，仅感染猪。多感染1周龄以下的猪，粪便呈黄色。剖检可见胃肠内的内容物为黄白色，有时带血，多有酸臭味。镜检可见大肠杆菌。

5）仔猪白痢 相似处：多发生于冬季，10日龄的仔猪多发。体温高达40度。腹泻，肠壁变薄，有乳凝块。不同处：白痢由大肠杆菌引起，只感染猪。感染后粪便呈灰白色，有腥臭味。胃粘膜充血，水肿，肠壁变薄，肠道有膨胀鼓气现象，内容物多为稀薄的黄白色粪便。镜检可见大肠杆菌。

6）仔猪红痢 相似处：主要感染仔猪，且病死率高。不同处：红痢由魏氏梭菌引起。主要感染 2日龄左右的仔猪。粪便为黄褐色带有组织碎片。胸腔、腹腔有樱桃红色积水，肠系膜淋巴结水肿，肠腔充满血红色液体，空肠呈暗红色。

2、实验室诊断

1）病原检测

分离培养是轮状病毒病原检测的经典方法。缺点是培养条件要求高，分离时间较长，且操作过程繁琐，耗费较多，不适于在基层推广应用。免疫荧光技术检测轮状病毒是把发病早期的空肠或内容物制成压片，用轮状病毒荧光抗体染色，可通过镜下观察肠绒毛上皮的胞浆区域是否检测到荧光，具有操作简单、诊断快速、敏感性和特异性高等特点。荧光定量RT-PCR 技术灵敏度与特异性都比较高，可对样品进行快速、大量检测。环介导等温扩增技术与常规RT-PCR相比，可以省略模板的热变性、温度的循环、电泳条带及紫外灯观测等一系列过程。基于核酸序列的扩增技术（Nucleic acid sequence-based amplification，NASBA）是RNA体外扩增技术的一种，可以理解为RNA-PCR。若标本中含有靶细菌和病毒时，NASBA-ELISA系统就会产生非特异性信号。利用该系统检测快速、简便，具有灵敏度高，特异性强的优点。

2）抗体检测

ELISA 检测方法的优点在于它的操作过程比较简单、便捷，重复性比较高，高通量、价格低等。目前，广泛应用于RV检测的是双抗体夹心ELISA法，可根据检测目的的不同设计包被抗体与检测抗体。相对于过去采用的高效价抗血清和多克隆抗体，单克隆抗体技术不仅克服了体外培养病毒的限制，减少了对高效价免疫血清的需求，提高了特异性及灵敏度，还可以进行血清分型和毒株鉴别，适用于临床大规模检测和流行病学调查。乳胶凝集试验操作简便、检测时间短、对试验仪器要求不高，适合应用于基层检疫部门的检测方法，但如果采集了含有较多油脂或其他悬浮物的腹泻样品，不能彻底离心，就会形成影响检测的非特异性凝集物，造成结果不准确。胶体金免疫技术无需特殊仪器，无污染，价格低廉，结果直观，是目前检测轮转病毒最简便、最快速的方法。

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