2017年度猪蓝耳病原检测报告

2017年1月份至12月份，广东永顺生物制药股份有限公司技术服务部从全国各地送检的380个猪场共1083份样品当中，检测到蓝耳病病毒核酸阳性有169个猪场，一共301份样品，即蓝耳病原场阳性率为44.5%（169/380），样品阳性率为27.8%（301/1083），可见当前猪场的蓝耳带毒排毒现象相当普遍。现将检测结果详细介绍如下：

参照GB/T 18090-2008 猪繁殖与呼吸综合诊断方法和GB/T 27517-2011 鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合RT-PCR方法，以及从NCBI下载蓝耳毒株的基因（组）序列，分别针对蓝耳病病毒N基因、nsp2基因和gp5基因设计特异性引物，对全国各地猪场病料（含血清）中的蓝耳病病毒进行RT-PCR检测。针对N基因（ORF7）的引物为：P1：5’-GCG GAT CCA TGC CAA ATA ACA AC-3’、P2：5’-AGC TCG AGT CAT GCT GAG GGT GA-3’，扩增片段为372bp。针对nsp2基因的引物为：P3：5’-GGT TCG GAA GAA ACT GTC GG -3’、P4：5’-AGC AGG TGG AAG AAG CGA ATC -3’、P5：5’-GAG CTG AGT ATT TTG GGC GTG-3’，P3/P5引物对扩增片段为400bp可判为变异株，P4/P5引物对扩增片段为264bp可判为经典株。

2017年1月份至12月份蓝耳病原样品阳性率统计见表1和图1，发现蓝耳病原样品阳性率在8.5%至71%之间变化，整年下来，平均不到四份样品中就有一份是蓝耳病原阳性，可谓是“蓝天之下一片蓝”呀！

然而，蓝耳病原阳性场的比例，会更高一些；而蓝耳抗体阳性场的比例，估计又会更高一些。2017年1月份至12月份蓝耳病原阳性场的占比见表2和图2。从图表可知，差不多有一半猪场是蓝耳病原阳性场。可见，蓝耳病毒已经普遍在猪场里面“定居”，当然，不能排除有部分病毒是疫苗毒，毕竟蓝耳活疫苗免疫后也可以在血液以及组织器官里面存在一段时间。

将2017年度的蓝耳病原阳性样品进行送样测序，成功测定了共219株蓝耳病病毒的gp5序列。应用DNAStar软件把该219株gp5基因序列和美洲型变异株、国内经典株、美国经典株、GM2类重组毒株、NADC-30类毒株以及欧洲型毒株相应的gp5基因序列进行分析和比较，并利用MEGA 6软件绘制系统进化树（见图3）。

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