|
随着疫苗规模化生产技术突飞猛进的发展，以细胞规模化培养为载体进行疫苗生产已成为当今生物技术产业化开发中的核心支撑技术。中农威特始终以科技创新为理念，潜心研究规模化口蹄疫疫苗生产技术，建立具有普遍指导意义的QbD驱动的细胞病毒生产过程优化策略，实现了规模化培养、抗原浓缩纯化及疫苗乳化等关键技术突破，解决了影响疫苗质量的瓶颈问题,并集成关键技术自行设计并建成了国际一流、国内领先的口蹄疫疫苗规模化、自动化生产线，引领口蹄疫等重大动物疫病疫苗产业化技术进步升级。具体如下：
1.拥有定向设计的种毒
疫苗生产中应用国际首例反向遗传改造种毒，在“疫苗种毒”源头进行基因组改造和技术提升，克服了以流行毒株作为种毒的自然属性缺陷，突破了常规疫苗种毒筛选技术的“瓶颈”，促进高效疫苗的发展。
2.选育驯化出了产能高、增殖能力强的细胞株
公司应用现代细胞生物学技术，从细胞凋亡率、细胞成活率、细胞密度、关键受体等诸多方面对BHK21细胞进行系统研究，最终驯化成功了增殖能力强、成活率高、病毒的敏感性好、产能较高且适合规模化生产模式的细胞株，掌握了实现疫苗规模化生产的核心技术。
3.建立了个性化培养基平台
在大规模细胞培养技术中，培养基对细胞的增殖、维持至关重要。目前，国外生物制品企业普遍采用个性化培养基，而国内多采用目录培养基，这些目录产品难以达到生物反应器大规模培养动物细胞的增殖需求，这就催生了个性化培养基研发平台的建立。因此，中农威特公司采用多尺度科学理念，剖析BKH21细胞的代谢流特征，通过DOE设计，进行高通量培养基组分筛选，建立QbD指导的个性化培养基研发技术平台，成功设计出符合细胞和病毒增殖的个性化培养基并应用于生产实践，实现了BHK21细胞病毒产能和代谢副产物富积可控的规模化培养模式，满足了细胞病毒规模化增殖的需求。
4.首次将多尺度细胞质量控制理念应用到生产实践
在规模化生物反应器悬浮培养过程中，细胞更容易受到环境的作用而发生死亡或凋亡。因此，控制细胞质量是未来规模化技术中的一个必要环节。中农威特公司通过对细胞周期、细胞凋亡、细胞内关键酶活性等方面进行科学系统的研究，首次将多尺度细胞质量控制理念应用到规模化生产实践，监测细胞生长状态，为提供高品质的细胞提供科学的控制途径。
5.确立可控的规模化培养方案和质量控制体系
基于QbD理念，确定关键过程参数和关键质量相关参数的可操作空间，制定了BHK21细胞及口蹄疫病毒抗原生产的过程优化策略与可执行方案，形成了一套疫苗规模化生产工艺流程、过程控制标准和质量管理体系，确保了生产过程稳定可靠。
6.创立了独特的四步抗原浓缩纯化方法
口蹄疫抗原的有效含量直接决定着免疫的成败，而杂蛋白是诱导副反应的重要因素。在提高抗原含量的同时有效去除杂蛋白是浓缩纯化工艺的关键。中农威特公司自主研发的四步浓缩纯化法，使抗原浓缩纯化倍数达20～200倍，抗原回收率达95%以上，杂蛋白去除率大于98%，实现了生产过程严格受控，避免了病毒抗原生物学活性的下降，确保了疫苗的质量。
7.拥有精准的乳化工艺
通过不断优化乳化工艺，确立了以疫苗粒径大小和分布为标准精准化乳化工艺，提升了疫苗的靶向性。
8.建立了大规模全自动化悬浮培养生产线
中农威特公司集成上述关键技术，自行设计并建成了规模化生产线（8×3000L体积），完全实现全自动、全封闭、管道化的生产模式，可年生产高质量疫苗达20亿毫升以上，为我国口蹄疫疫情的防控做出了重大贡献。
通过软件部分和硬件部分的改造升级，我公司疫苗质量实现质的飞跃，其中：单价疫苗146S含量约为10微克每头份，总蛋白小于80微克每毫升；二价苗的146S含量约为20微克每头份，总蛋白小于150微克每毫升；三价苗的146S含量约为30微克每头份，总蛋白小于250微克每毫升。每批疫苗的内毒素控制在5EU以内，PD50均高于15。养殖户在使用我公司疫苗过程中，最深切的感受就是免疫副反应基本消除，保护率进一步增强，免疫持续时间更长。
|
