兽医战略
非洲猪瘟的研究进展
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2.参与病毒基因复制和转录的酶和因子。如pB602L作为非结构蛋白，又是ASFV二十面体衣壳形成的必需蛋白，实验证实，pB602L作为主要衣壳蛋白p72校正折叠的肽链分子装配的陪伴蛋白（如热休克蛋白等），在ASFV病毒的晚期装配过程中，转化为重组体vpB602Li, 它的作用方式是诱导相关蛋白基因密码的表达。pB602L蛋白合成受到阻遏，能抑制病毒多聚蛋白pp220和pp62的蛋白水解过程，从而降低蛋白p72水平及影响衣壳蛋白pE120R的离域作用。同时感染细胞过程的电镜分析显示，pB602L蛋白水平的降低会明显影响病毒的装配过程，产生“拉链”结构，与其它在抑制条件下的细胞产生的变体结构相似。免疫电子显微实验显示pB602L蛋白的缺失除了会引起p72和pE120R的不足，还会引起包膜蛋白p17和其它多聚蛋白的非正常状况。 3.调节宿主细胞功能的蛋白。如钙神经素磷酸酶抑制因子、C型凝集素样蛋白等。p10蛋白被称为假定DNA吸附蛋白。实验已经证实了p10蛋白被程序性运至细胞核。Isabel等通过酵母表达分析和荧光显微法两种方法观测了p10蛋白在亚细胞结构中的位置，进一步证实了p10蛋白的第71位和第77位氨基酸对于病毒蛋白在ASFV感染细胞过程中的重要作用。蛋白pE120R是细胞内病毒向细胞膜转运的关键蛋白。A238L是NF-kappa B和依赖钙调蛋白的磷酸脂酶的抑制物。Silk RN等检测了蛋白 A238L在细胞核和细胞质的运输，显示A238L蛋白的运输是通过CRM1介导途径完成。当ASFV的A238L基因的敲除，则不能抑制NF-kappa B及p50、p65亚单位的入核和p65通过CRM1介导途径输出。 4.多基因家族编码的病毒蛋白。如MGF530、MGF360、MGF300和MGF100的编码产物等。由于ASFV能在哺乳动物和软蜱的细胞内复制，所以有些基因可能专门负责病毒在蜱的体内复制。并且这些多基因家族数量差异是不同ASF毒株基因组长度差异的主要原因。 （五）理化及生物学特性 ASFV对酸碱度适应性较好,对温度较为敏感，55℃30 min或60℃10 min可以使其灭活。血清能使其稳定性明显的提高。存在于25%血清中的ASFV，37℃时的半活存期为24 h；但当无血清时，半活存期缩短为8 h。ASFV可在病猪的血清和分泌物中长期存活。在病毒灭活方面，0.05%的β-丙内酯和乙酰乙烯亚胺(AEI)可在37℃在60 min内使其灭活。1%福尔马林需6 d可致死病毒。2%氢氧化钠在24 h内使其灭活。ASFV对乙醚及氯仿等脂溶剂敏感。带囊膜的ASFV病毒粒子能够明显抵抗蛋白酶的作用，但易被胰脂酶灭活。而胃蛋白酶可作用于无囊膜病毒粒子的六角形衣壳，而胰蛋白酶则不能。 (六)病毒的复制 ASFV病毒通过受体介导的吞饮作用进入细胞，在吸附和进入细胞的过程中，多种病毒蛋白如p12、p30、p54、p72参与，因此针对上述蛋白的特异性抗体均能阻断病毒的吸附或内吞，目前关于病毒结合的细胞受体的报道较少。当病毒进入细胞后，病毒核心转移到细胞核周围，利用包装在病毒核心的酶和因子进行早期mRNA的转录，以提供mRNA早期合成和加工所需的酶如DNA聚合酶等。转录产物3’端含poly A尾，5’端有“帽”结构。在感染后6 h，病毒开始在细胞浆中复制，8 h达到高峰，在细胞内出现连接体DNA。ASFV虽然是DNA病毒，在细胞浆中复制，这一点与痘病毒相似，却与其它DNA病毒不同。ASFV病毒蛋白在细胞质特定位置完成装配过程，靠近微小管生成中心，附近有弹性蛋白、新线粒体、及微孔陪伴蛋白。病毒的形态发生是开始于内质网（ER）腔的扩大，转变为病毒膜结构的前体。外膜前体发育成二十面体结构是是ATP依赖、Ga2+依赖反应，在由p72蛋白组成递增的衣壳片层的过程中形成的。同时，衣壳核心区域在病毒被膜内部形成。最后病毒DNA和核蛋白被包裹和富集浓缩形成类核体，通过破坏细胞或胞浆膜出芽释放。 (七)病毒的培养 ASFV能在鸡胚卵黄囊内生长，大多数毒株能在猪的单核细胞、骨髓细胞和白细胞内生长，适应猪肾细胞的毒株也能在牛、鸡肾细胞、BHK-21、MS细胞、CV细胞和Vero细胞中传代生长，产生包涵体样的细胞病变，但有一些毒株并不导致细胞病变。 二、流行病学 |
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