河北省兽医实验室理论考试习题（九）
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11、尿素酶试验原理是有些细菌能产生尿酶分解尿素产生氨，使培养基呈碱性，从而通过酚红指示剂变为红色。（√） 12、正向间接血凝试验是将可溶性抗原致敏于红细胞表面，用以检测相应抗体；反向间接血凝试验是将抗体致敏于红细胞表面，用以检测相应抗原。（√） 13、分子生物学实验室布局应该各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流，形成单向流程的保护屏障，避免实验之间的相互干扰，防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。 （√） 14、革兰氏染色的关键步骤是酒精脱色。（ √ ） 15、培养细菌时，培养基中的营养越多细菌生长得越快。（ × ） 16、链球菌在自然界中广泛存在，所以猪链球菌的培养要求不高，一般培养基都能生长的十分茂盛。（ × ） 17、沙门氏菌在SS培养基上菌落为无色，而大肠杆菌为红色。（ √ ） 18、将获得的单个空斑制作悬液，梯度稀释后再作空斑，最终可获得只含一个病毒颗粒及其子代的空斑，这就是病毒克隆。（ √ ） C、简答题 1、简述实验室检测的目的与意义？ 答：（1）确诊疾病。 （2）检测、监测和流行病学调查。 （3）检测疫苗免疫效果和母源抗体。 （4）疾病检测净化。 2、什么是PCR，有什么特点，扩增反应有哪几个步骤？ 答：PCR即聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)，具有特异、敏感、快速等特点。扩增反应包括3个步骤，变性、退火（复性）、延伸3个步骤。 3、什么叫ELISA，ELISA有哪三种基本反应类型？ 答：ELISA是酶联免疫吸附试验，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。基本反应类型有间接ELISA、（双抗体）夹心ELISA(或捕捉ELISA)、竞争ELISA(或阻断ELISA)。 4、正向间接血凝试验和反向间接血凝试验有何不同？ 答：正向间接血凝试验是将可溶性抗原致敏于红细胞表面，用以检测相应抗体；反向间接血凝试验是将抗体致敏于红细胞表面，用以检测相应抗原。 5、简述禽流感HI试验中非特异反应产生的原因以及消除方法？ 答：禽流感HI试验中非特异反应产生的原因是血清中含有非特异性血凝抑制因子，其消除方法包括：（1）受体裂解酶（RDE）处理法；（2）高碘酸盐-胰酶处理法；（3）对于水禽和野禽血清，可采用与高浓度（5％～10％）鸡红细胞混合吸附法；（4）同种动物红细胞处理法。 6、PCR检测过程的污染控制措施有哪些？（请回答2种以上） 答： （1）对实验室进行严格的分区（包括配液区、提取区、扩增区和产物分析区的分区；也包括DNA和RNA提取的分区），以及严格控制物流的方向。例如：各个区的东西不交叉使用（包括白大褂、帽子、手套、板架、移液器、提取设备、提取试剂等）； （2）严格控制环境：工作过程中尽量防止扩增物的扩散；垃圾等污染物要及时清理；用紫外线消除长片段污染物；实验空隙多通风，降低单位空间中的污染物；实验中严格控制层流；实验中使用帽子和口罩。 （3）设立质控，实验过程的阴阳性对照是查找污染源的很好方法； （4）分装试剂，大包装的试剂应当分成小包装后使用； （5）UDG酶的使用，可以有效控制污染物； （6）其他有效措施。 7、抽提RNA时如何防止降解？（请回答2种以上） 答：（1）保持低温； （2）尽量减少抽提时间，减少暴露在空气中的时间； （3）使用DEPC水处理的耗材和试剂； （4）使用RNA酶抑制剂； （5）处理组织时，尽量灭活内源的RNA酶； |