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4、简述培养基制作的一般要求。
（1）培养基必须含有细菌生长繁殖所需要的营养物质。所用的化学药品必须纯净，称取的份量务必准确。
（2）培养基的酸碱度应符合细菌生长要求。按各种培养基要求准确测定调节pH值。多数细菌生长的适宜pH值为7、2～7、6，呈弱碱性。
（3）培养基的灭菌时间和温度，应按照各种培养基的规定进行，以保证灭菌效果及不损失培养基的必需营养成分。培养基经灭菌后，必须置37℃温箱中培养24小时，无菌生长者方可应用。
（4）所用器皿须洁净，忌用铁或钢质器皿，要求没有抑制细菌生长的物质存在。
（5）制成的培养基应该是透明的，以便观察细菌生长性状以及其他代谢活动所产生的变化。
5、简述细菌培养基制作的一般过程。
答：不同的培养基其制备方法也不同，一般包括以下步骤：
（1）准确称量试剂 根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。
（2）校正pH值 将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6、8～8、0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
（3）过滤 将玻璃漏斗置铁架上，再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。
（4）分装 将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。
（5）灭菌 培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。
6、简述甲醛熏蒸消毒方法及注意事项。
（1）按照每立方米甲醛（40%）10毫升、高锰酸钾5克计算用量。将甲醛倒入盛有高锰酸钾的容器内。不同情况用量有所不同，但比例为2：1。
（2）盛药容器要大、耐热、耐腐蚀：一般用陶瓷或玻璃容器，因为高锰酸钾和甲醛都具有腐蚀性，且混合后反应剧烈，释放热量。
（3）房间要密闭：这样熏蒸效果才会好。
（4）容器应尽量靠近门，以便操作人员迅速撤离；先将温水倒入容器内，后加入高锰酸钾，搅拌均匀；再加入甲醛；加入甲醛后人立即离开，密闭房间。
（5）消毒时间一般为20-30分钟。
（6）消毒后要打开门窗通风换气。
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