悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的比较分析

图4 反应器微载体培养96hr，100X

    结果显示，转瓶培养的Vero细胞，培养72小时左右显微镜下观察细胞成单层见图3，维持培养至144小时培养液pH值较低，培养液中出现部分漂浮细胞；反应器微载体培养的Vero细胞，培养96小时，微载体上细胞致密，轮廓清晰，显微镜观察照片见图4；维持培养6~7天，密度可达4.0×106cells/ml。单从细胞数量比较，1个反应器微载体培养（5g/L的Cytodex 1，培养体积70L）的细胞数量约相当于150~250个15L转瓶的数量。
    2.4 病毒培养效果对比
    两种不同的培养工艺，以同种条件分别接种狂犬病毒，转瓶培养的Vero细胞，接种病毒3天左右开始进行第一次病毒液收获，此后隔2天左右进行再次收获，共收获3次；反应器培养细胞接毒2~3天开始收获病毒液，连续收获10天以上。收获取样测定病毒滴度见表5。

    表5 转瓶培养和反应器微载体培养Vero细胞生产狂犬病毒滴度对比

    结果表明，反应器微载体培养的狂犬病毒滴度不低于转瓶培养工艺。本次实验转瓶收获体积为4.5~5L/瓶，反应器微载体悬浮培养的收获体积1000L左右，反应器收获病毒液的量相当于200个15L转瓶左右的生产量。
    2.5反应器和转瓶经济效益估算对比
    采用两种不同的培养工艺，反应器微载体培养和转瓶培养Vero细胞狂犬病毒经济效益估算对比见表6：（按照一条5L~120L反应器微载体培养生产线与15L转瓶生产线进行对比）。

表6 反应器微载体培养和转瓶培养Vero细胞狂犬病毒经济效益对比

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