1.4 病毒培养效果对比
两种不同培养工艺，细胞在满足活力要求的基础上，以同等条件分别接种FMDV病毒，取样测定病毒毒价，结果见表2。 表2 转瓶和反应器全悬浮培养BHK21细胞病毒毒价对比 | 培养工艺 | 血清浓度 | lgTCID50/0.1mL | lgLD50/0.1mL | | 接种10h | 接种12h | 接种10h | 接种12h | | 转瓶培养 | 3% | / | 7.0 | / | 7.5 | | 反应器培养 | 无 | 7.75 | 7.25 | / | 7.25 |
结果表明，无血清悬浮培养的口蹄疫病毒毒价（TCID50和LD50）检测不低于转瓶培养工艺。根据反应器低血清悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫完整病毒粒子（146S）检测较转瓶高10倍左右的情况[3]，应用无血清悬浮培养工艺，杂蛋白含量更少，口蹄疫完整病毒粒子和口蹄疫疫苗质量均提高。
1.5 反应器和转瓶经济效益估算对比
依据培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒工艺过程要求，从细胞密度、病毒毒价、产品效力、资源环境、劳动力等方面进行简单对比，借以一窥二者的经济效益差别（见表3）。 表3 反应器无血清悬浮培养与转瓶培养BHK21细胞经济效益对比 | 项目 | 转瓶培养疫苗 | 反应器悬浮培养疫苗 | | 培养方式 | 转瓶贴壁细胞培养 | 悬浮细胞培养 | | 毒价（TCID50 /LD50） | 7.0/7.5 | 7.25/7.25 | | 细胞密度（cells/ml）* | 2.5-3.5 x 106 | 3×106 | | 工作体积* | 1.5L | 500L | | 均一性 | 培养体积小，需混合，批间差大 | 培养体积大，无需混合，批间差小 | | 产品效力 | 不可控 | 稳定可控 | | 蛋白纯化 | 含血清，杂蛋白含量高，纯化复杂 | 无血清，杂蛋白含量低，纯化简单 | | 配苗比例 | 需浓缩 | 稀释5-10倍 | | 产品质量 | 产品质量较低 | 杂蛋白含量低，产品质量较高 | | 劳动力需求 | 多 | 少 | | 车间条件要求 | 培养室面积大，需恒温 | 培养室面积小，无恒温要求 | | 设备与自动化程度 | 作坊式半开放人工操作 | 全封闭管道化的自动化控制 |
*按照反应器无血清悬浮培养一条生产线（5L-120L-650L）、转瓶体积15L进行对比
按照目前培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒质量要求，对悬浮无血清培养工艺的产能进行预估，一条5L-120L-650L的反应器生产线年生产病毒量约为2.1亿毫升，生产疫苗量约为4.2亿毫升。
2、人狂犬病毒微载体培养与转瓶培养的对比
我国是受狂犬病危害最为严重的国家之一，近年报告狂犬病死亡人数均在2400人/年以上，一直位居我国各类传染病报告死亡数的前三位，根据有关国家成功控制狂犬病的经验，世界卫生组织提出倡议，到2020年消除人狂犬病[4]。我国距此倡议目标还有大量工作要做，国内也对人用和兽用狂犬病疫苗的生产做了大量研究工作。下面就120L反应器微载体培养Vero细胞生产狂犬病毒效果与转瓶培养工艺和培养效果比较分析。
2.1主要材料
细胞株：Vero细胞株
毒 株：aG株 （细胞株和毒株均来自某人用疫苗企业）
培养基：低血清199培养基（产品代号MD504）、 Vero细胞反应器培养用培养基（产品代号MD505）, 均来自北京清大天一科技有限公司
仪 器：5L反应器（德国贝朗）、120L CLAVORUS®生物反应器（北京清大天一科技有限公司）
血 清：特级新生牛血清（杭州四季青生物工程材料有限公司）
微载体：Cytodex 1 （美国GEHC）
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