4.1 生物传感器技术(BS) 生物传感器技术是当今世界上备受关注的综合高科技技术之一。所谓生物传感器即由生物活性物质作为敏感元件,即生物识别系统(感受器),再配上适当的换能器及输出显示装置所构成的分析工具。其原理为分子识别部分与被识别物质相接触,可发生化学变化、热变化、光变化以及直接诱导电信号,而后利用电学测量方法进行检测和控制及显示输出。最早研制成功的是1967年Updike等研制的葡萄糖传感器,它是一种酶传感器。国外已有用生物传感器技术检测CLB残留的资料报道,如PizzarielloAndrea应用分子印迹聚合膜(MIP)作为分子识别系统,选择固相基质复合电极(SBMCE)作为换能器,微分脉冲电压电流表(DPV)作为输出显示装置检测牛肝脏中CLB残留,结果此方法特异性强,与其他同类物质交叉反应低,缺点是反应时间较长,灵敏度还有待于提高。 酶标免疫传感技术是酶标免疫技术与光电分析技术相结合而产生的一种电化学免疫分析技术,是利用生物传感器进行免疫测定的一种实验手段。其特点是利用酶的化学放大作用,通过测定抗原或抗体标记酶作为示踪酶,将酶与底物反应的化学变化用换能器转化为电信号,从而输出待测物质的含量。目前酶免疫传感器的灵敏度最高可达0.01ng/g,而且可在几分钟之内完成检测全过程,比ELISA法更灵敏、更简便和快速,而且可用于各种抗原物质的测定,尤其对体液中的药物和激素的检测更为适用。所以,如果研制成功测定CLB残留的酶免疫传感器,则可使CLB的监测及检测工作变得简单、高效。 4.2 滴金免疫技术(DIGFA) DIGFA是近年发展起来的一种快速免疫学测定方法,它是胶体金标记技术与快速免疫斑点结合技术相结合的产物。该方法具有与酶联免疫吸附试验(ELISA)相似的特异性和灵敏性,且快速简便,特别是操作无需任何仪器,不经过特殊训练就可得到正确的结果。DIGFA的关键技术是抗CLB单克隆抗体的制备、胶体金的制备、胶体金标记的单克隆抗体的制备、免疫渗滤装置(如硝酸纤维抗体包被膜)的制备。后三种关键技术已比较成熟,最关键的是制备出特异性强、纯度高的抗CLB的单克隆抗体。目前,DIGFA已成功地运用于早孕诊断、弓形虫病诊断、血吸虫病诊断等,灵敏度及准确度均很理想。如果研制成检测CLB的滴金免疫试纸条或滴金免疫测试盒可实现CLB的高效现场检测。所以运用DIGFA技术将是一种较理想、很有发展前景及研究价值的检测CLB技术。 5 结语 上述四种检测CLB的方法中,HPLC、GC-MS、CE的最低检测限都在0.5ng/g以上,而且检测过程烦琐、检测时间长,需贵重仪器、难于操作,不能实现现场检测;EIA法最低检测限可达0.05ng/g,灵敏度和精确度都符合标准,但假阳性率高而且也不能实现现场检测。如果研制成功检测CLB残留的酶免疫传感器和DIGFA试纸条,则可克服上述方法的缺点,并且从定性和定量两个方面实现CLB残留的现场监测。所以,研制高效、方便、迅速的DIGFA试纸条和酶免疫传感器是检测CLB残留的较为理想的方法和途径,值得深入探讨和开发。 |
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