良种繁育
肉牛双胎技术的研究与应用
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2.4 生殖免疫技术 生殖免疫是现代高新生物工程技术之一，它是在免疫学、生物化学、内分泌学等学科基础上兴起的。生殖免疫的基本原理是以生殖激素作为抗原对动物进行主动或被动免疫，中和其体内相应的激素，可使其体内某些激素的水平发生改变，从而引起生殖内分泌的动态平衡发生定向移动，引起各种生理变化，达到人为控制生殖的目的。在人工诱导母牛双胎的生产中，经常使用促性腺激素、甾体激素和抑制素作为免疫原。 2.4.1 促性腺激素免疫法 在生产中常用的诱导双胎的促性腺激素主要有 PMSG 、 FSH 、 LH 、 HCG 等。 PMSG 因半衰期长，处理时只需注射一次，特别是同抗 PMSG 配合使用以后，使 PMSG 的副作用大大降低，使其在生产实践中有了更多的应用。 PMSG 处理的弊端是不能控制产犊数。剂量小时，双胎效果不明显；剂量大时，则会出现相当比例的三胎或四胎，影响犊牛的出生重或成活率，有时还会造成母牛卵巢囊肿或难产。 2.4.2 甾体激素免疫法 目前市场上的双胎素的主要成分以睾酮和雄烯二酮居多。由中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所研制的“兰双”（代号： TIT ）主要成分为睾酮 -3- 羧甲基肟 - 牛血清白蛋白；由中国科学院新疆化学研究所研制的“新双”（代号： XIC ）主要成分为雄烯二酮 -11 α - 牛血清白蛋白；由澳大利亚生产的“澳双”其主要成分为雄烯二酮 -7 α - 羧 L 基硫醚 - 人血清白蛋白。应用双胎素对母牛进行免疫时，应严格按其使用说明书上给出的用法、用量和时间间隔进行操作，否则会严重影响免疫效果。 2.4.3 抑制素免疫法 抑制素（ Inhibin ， INH ）是一种由性腺分泌的糖蛋白激素，其生理作用是选择性降低血液循环中 FSH 的水平，是确定单胎和多胎动物种属特异性排卵数最重要的激素。用主动免疫或被动免疫的方法降低体内的抑制素水平，可以使 FSH 的浓度增加，进而增加母牛的排卵率和产犊数。牛树理等用猪精液提取的抑制素粗品对黄牛进行主动免疫，结果有 36% 的母牛排 2 个以上卵，提高了排卵率 [5] 。叶荣等（ 1995 ）为研究中和内源抑制素对排卵率的影响，用猪精液抑制素粗品对产后 2 ～ 5 月的 25 头黄牛进行主动免疫，粗品用完全福式佐剂乳化后间隔 20d 免疫 2 次，结果表明用精液抑制素主动免疫可以提高其排卵率 [6] 。桑润滋等用猪精清抑制素抗原主动免疫母牛后，发现可提高牛的超排效果，增加胚胎数 2.4 枚和可用胚胎数 1.4 枚，但可用胚胎率稍低 [7] 。杨利国等用猪精液抑制素主动免疫黄牛，妊娠期末 57 头母牛中有 15 头产出双犊，孪生率达 26.3% [8] 。目前所用的抑制素抗原主要是从卵泡液或精液中提取的，有化学合成的，也有利用 DNA 重组技术生产的。有关用抑制素免疫提高母牛繁殖力的研究很多，其结论是一致的，即抑制素免疫可以提高家畜的繁殖力。但是由于抑制素制备比较困难、成本高，使该项技术没有得到广泛的应用。因此，探索生产抑制素的新方法和新的免疫策略成为免疫繁殖技术的研究热点之一。 2.5 基因免疫技术 基因免疫又叫 DNA 免疫或核酸免疫，是将带有目的基因的真核表达载体转化到动物活体细胞内、使其表达产物经抗原递呈激活免疫系统、诱导机体产生特异性抗体并引起相应免疫应答的新技术。这种用于基因免疫的 DNA 制剂，就称为基因疫苗或 DNA 疫苗。 DNA 疫苗有“第三代”疫苗之称，是近年来调控动物生殖的重要研究途径之一，已受到国内外的广泛重视。基因疫苗的诞生和发展，为抑制素免疫提供了新契机。 抑制素基因免疫建立在基因免疫与抑制素常规免疫基础上，将编码抑制素抗原决定簇的外源基因以重组表达载体的形式转化入动物体内，使目的基因通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生抗体并引起相应的特异性免疫应答，可以长时间地降低体内抑制素水平，从而提高动物的排卵率和精子的产量，以其疫苗高效稳定、操作简便、便于生产等优势弥补了以往诱导双胎技术的不足。崔先利等（ 2006 ）应用抑制素真核融合表达质粒 pCISI 免疫黄牛，诱发排双卵（ 60.71% ， 51/84 ），诱导黄牛孪生率达到 41.03% （ 32/78 ），且普鲁卡因佐剂（ 48.78% ）比脂质体（ 32.43% ）效果明显 [9] 。 所以，应用抑制素基因免疫可中和牛体内的抑制素，降低肉牛血液循环中的抑制素水平，提高 FSH 的含量，促进肉牛卵泡发育和成熟，达到提高排卵数量的目的，进而提高了繁殖效率。 2.6 营养调控技术 营养调控技术对提高母牛产犊率起到重要作用。配种前营养水平的高低对母牛的繁殖力影响很大，主要采用配种前短期优饲、补饲维生素 E 和维生素 A 制剂以及微量元素等措施。配种前的母牛采取适当的营养调控措施，改善母牛体况，以利于母牛产双犊。一般情况下，采取这种处理，待配种开始后，恢复到正常饲养水平。从经济效益上分析，加大短期投入，不会增加生产成本，投入恰到好处，可以提高生产效益。 通过综合应用动物现代繁育技术、品种改良技术、动物营养调控技术、疫病综合防治技术等，有效利用肉牛双胎技术，不断促进肉牛生产向优质、高产、高效和持续性的产业化方向 发展，提高产品的质量，增加数量，最终达到提高养牛业的经济效益的目的。 |
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