临床兽医
犬瘟热病的研究概况
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（四）视觉症状 狗明显的眼科损伤发生在视神经和视网膜。患视神经炎时会突然失明，同时伴有瞳孔散大，刺激瞳孔无反应。视网膜可退化或坏死，发生部分或完全的视网膜脱落。 （五）胎盘感染 母犬怀孕期间感染CDV，可能出现流产、死胎或生弱仔。胎儿在子宫内感染犬瘟热后，原始的免疫因子被损伤，可能出现永久性免疫缺陷。 （六）新生期感染 幼犬在恒齿萌发前感染犬瘟热，可能损伤牙釉质、牙本质和牙根。幼犬长出的牙釉质、牙本质可能有不规则现象，稍大些的犬可能出现牙釉质发育不全，并可能伴有神经症状[13]。 （七）混合感染 继发细菌或病毒感染使犬瘟热的症状复杂化。大肠杆菌、葡萄球菌、沙门氏菌、败血杆菌、腺病毒、冠状病毒等致病微生物可能和犬瘟热混合感染，死亡率表现各异。 四、病理变化 （一）剖解变化 CDV为泛嗜性病毒，对上皮细胞和淋巴细胞有特殊的亲合力，因此病变分布非常广泛[17]。部分病例皮肤可出现水疱性或脓包性皮炎，有些病例足底表皮角质增生；呼吸道黏膜有卡他性或浓性渗出液；消化道可见卡他性肠炎、胃粘膜出血、小肠前段出血；部分病犬脾脏和膀胱粘膜出血；在无并发症的情况下胸腺萎缩且可能呈胶冻状；肾上腺皮质变性；死于神经症状的病犬，脑膜充血、出血，脑室扩张，脑脊髓液增多[15]。 （二）组织病理学变化 陈建国等[18]报道，对病犬进行组织学检查可以发现，在很多组织细胞中有嗜酸性的核内和胞浆内包涵体，呈圆形或椭圆形，直径1~2μm。脾窦扩张淤血、出血，白髓和红髓淋巴细胞明显减少。肺泡壁增厚，毛细血管扩张、充血，肺泡腔内充满大量浆液、红细胞、巨噬细胞、中性白细胞、脱落的肺泡上皮细胞，在肺小叶的局部区域可见肺泡壁破裂发生肺气肿，肺小叶间隔增宽，细支气管壁炎性增厚。淋巴结被膜疏松、水肿、增厚，副皮质淋巴窦和髓质淋巴窦扩张，其内充满大量浆液、巨噬细胞、淋巴细胞等。肠上皮细胞变性、坏死、脱落，肠腔内充满大量的黏液、坏死脱落的上皮细胞、中性白细胞、单核细胞等，腺上皮粘液变形，杯状细胞增多，有嗜酸性白细胞反应，黏膜下层水肿、增厚，毛细血管扩张充血、出血。扎西英派等[19]报道脊髓灰质中神经细胞肿胀，染色质溶解，神经细胞周围水肿，白质有大量空泡，因脱髓鞘而呈海绵状变化。 五、诊断 根据流行病学资料和临床症状，可以作出初步诊断。包涵体检查是诊断犬瘟热的辅助方法，最后的确诊需要依靠病毒的分离，病毒特异性抗原或抗体的检测和特异性核酸检测。 （一）包涵体检查 包涵体检查是诊断犬瘟热的重要辅助方法。包涵体主要存在于膀胱粘膜、支气管上皮细胞和肾盂上皮细胞内。包涵体多数在细胞质内，1个细胞可能有1～10个多形包涵体，呈圆形或椭圆形。 （二）电镜及免疫电镜检查 这是检查确定CDV感染简便快速的方法，制备电镜样品方法有：磷钨酸（PTA）负染色法、液相免疫电镜和超薄切片法。电镜观察的最佳病料是粪便，该诊断法从制样到镜下观察，整个过程只需要2～3h，可用于快速检查CDV粒子[20]。 （三）病毒的分离培养 CDV是具有囊膜的病毒，结构较脆，易被光和热灭活，对环境的抵抗力非常弱，因此病毒的分离成功率很低。病料采样部位、时间、样品的处理、病程类型、发病动物的抗病毒抗体的水平等因素对病毒分离成功与否有一定的影响，但最主要的是分离病毒的载体是否敏感和有效。闫喜军报道了我国犬瘟热病毒强毒株HBF-1培育成功，对研究犬瘟热发病机理以及犬瘟热疫苗的研究具有重要意义[21]。 （四）动物回归试验 雪貂最易感，死亡率接近100%，任何途径接种后均可在8～14d内死亡，或者选用断奶15d后的幼犬，皮下、肌肉或腹腔注射10倍稀释病料悬液3～5ml。也可在鸡胚、小鼠、仓鼠中适应生长，但敏感性较低。 （五）血清学诊断 刘润珍等[22]用特异CD高免血清与金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）致敏，用协同凝集试验检测CDV，仅3～5min就可获得诊断结果。吴曙光等[23]用CDV鸡胚成纤维细胞（CEF）弱毒疫苗免疫绵羊制备琼脂扩散抗体，用病貉肝脏制备琼脂扩散抗原，建立了琼脂扩散试验方法。与琼脂扩散试验相比较检出率提高20%。ELISA可用于评估犬瘟热的免疫和检测犬瘟热病毒。Soma T等[24]对比免疫过氧化物酶染色和抗体中和试验检测抗体效价，结果显示：免疫过氧化物酶染色可以检测到感染早期低水平的抗体。袁书智等[25]应用直接荧光抗体染色法对CDV检测，可作为CDV是否感染的指标以及CD生前和死后诊断方法之一。Oyedele O I等[26]建立了蚀斑减少中和法，评价疫苗接种效果和幼犬感染CDV的危险性。苏建青[27]利用双抗体夹心的原理，建立了犬瘟热病毒胶体金免疫层析诊断试纸条。 |
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