临床兽医
鸡白血病及其综合防控措施
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7.2 保持种鸡群对ALV的高度洁净状态 需要做好如下几方面: （1）从无外源性ALV感染的祖代鸡或原种鸡公司选购苗鸡，这有赖于商业合同或政府主管部门提供的可靠信息。 （2）一个鸡场只饲养同一品系和同一批（年龄）的种鸡。横向感染都是由近距离引起，同一鸡场内是无法隔离的。 （3）严格选用没有外源性ALV污染的活疫苗，并定期检测血清抗体状态。 （4）同一孵化厅只用于同一个种鸡场来源的种蛋，以预防孵化厅内可能的早期横向传播。雏鸡对ALV最易感，垂直感染的雏鸡出壳后就可排毒。孵化厅内鸡运输箱内高度密集，同一箱内有一只感染雏鸡，在运输期间可使同箱内20%～30%的接触鸡感染。 （5）预防潜在的昆虫传播。 （6）建议种鸡群自我检测。当对AB及J亚群抗体阳性率高于一定限度后自行淘汰，避免在客户鸡场出现问题后再发生纠纷。 7.3 强化弱毒疫苗中ALV污染的检测和监控 弱毒疫苗中外源性ALV污染是蛋鸡、三黄鸡和其它品系鸡中传播白血病的一个最可能的现实原因之一。对商品代鸡群来说，特别要注意一周龄内使用的活疫苗，如对马立克氏病和禽痘的活疫苗。但是在种鸡群，各种活疫苗都要检测，特别是非口服疫苗。前几年美国市场上供应的马立克氏病疫苗中还发现有ALV-A污染，我国生产的疫苗可能会问题更多。 问题是如何检测？要检测疫苗中的ALV污染，一定要区别内源性和外源性ALV，否则会带来很大的混乱，即报告很多的假阳性。可以根据情况依次从如下几种方法中做一选择： （1）经典方法（金标准）。将一定剂量（相当于雏鸡用量的3～5倍）活疫苗接种8～10只3～4周龄SPF鸡，在隔离罩中饲养4～6周后采血清，隔2周后用商品化的抗体检测试剂合检测ALV-AB和ALV-J特异性抗体。同时在另一隔离罩中饲养同批SPF鸡做对照。隔2周后重复一次。接种疫苗组中只要有2只或以上表现对ALV-AB和ALV-J特异性抗体阳性而对照组全阴性，即可判定疫苗有ALV-AB或ALV-J污染。如为阴性，可隔2周后重复一次。这一方法成功率高，结果比较可靠，但周期长，成本高，需要一定饲养条件。 （2）在DF1细胞（对E亚群ALV有抵抗力）上分离病毒，再用ALVp27试剂合检测。这一方法适用于在该细胞上不产生细胞病变的疫苗病毒。对但有些疫苗病毒感染后细胞死亡，无法进行。对细胞结合性马立克氏病疫苗，可先将疫苗细胞在超声波处理下裂解或用无菌蒸馏水稀释裂解后接种DF1细胞，以此最大限度去处MDV疫苗病毒复制。对于禽痘疫苗病毒，可先接种1周龄SPF鸡，再在7～10天后采血浆接种DF1 细胞。 （3）PCR扩增囊膜蛋白全基因及其相连的3’-末端序列，测序比较和鉴定亚群。鉴于有些细胞基因组中可带有ALV-AB、J的Env基因，单独扩增出Env基因还不能作为依据，一定要扩增到Env基因的及其相连的3’-末端序列，并证明其3’-末端序列中的LTR也是外源性ALV特异性的，才有较大把握作出判断。但要下最终结论，最好还要靠分离到病毒。 由于ALV的横向传播能力很弱，除非有严重的垂直感染，一般鸡群对外源型ALV抗体的阳性率是很少会高于30%的。因此，如果鸡群对ALV-AB 或ALV-J的抗体阳性率高于30%时，就要怀疑在过去用过的弱毒活疫苗中是否有哪种疫苗有ALV污染。这对种鸡场尤为重要，虽然在使用被ALV-AB 或ALV-J污染的疫苗后的鸡群不一定就会发生肿瘤（一般不会，因为鸡对ALV的抵抗力有很明显的年龄依赖性），但有可能是给下一代造成垂直感染的来源。因此，有必要对种鸡群作定期的血清学检测。 7.4 原种鸡群的净化 对我国自行育种并已形成相应品系的自繁自养种鸡群，应该对外源性白血病感染实施定期检测和严格的净化措施。这项工作在技术操作上涉及到育种选种和长期病毒感染检测的诸多方面措施，需要较大的资金投入。作为一个大国，必须要有自己自繁自养种鸡群，但也必须实现对白血病的净化。这需要从国家层次，由政府立项资助几个不同类型种鸡的龙头企业完成净化并保持净化状态。这一方面是企业行为，但也要政府在技术和资金方面资助，并实施监控。 净化的基本原则：（1）小群孵化小群饲养（20～50只/群）；（2）每只采样分离病毒或检测p27，淘汰所有阳性鸡及所有同群鸡；（3）严格选用弱毒活疫苗；（4）严禁不同种群鸡共用孵化厅。 在我国现有条件下原种鸡群净化方案列举如下（仅供参考）： 方案A （国际金标准）完全按美国乔治亚大学禽病诊断和研究中心现在正在使用的方法。 对核心群鸡全部采血浆接种DF-1细胞，9天后检测p27抗原，凡阳性者全部淘汰。分别在68日龄和168日龄至少做二次采血分离病毒。对保留的核心群种鸡的下一代所有刚出壳鸡，检测胎粪中的p27，淘汰所有阳性鸡。如此反复。 这一方案的优点是，检测特异性和检出率均很高，如严格实施4～5年，就有可能实现基本净化，此后只需抽样监控，不再全面检测。缺点是，现在就需要投入的资金、设备和人力较大，而且还没有足够数量的训练有素的有经验的技术队伍。方案B 基本原则：根据泄殖腔棉拭子及蛋清中gsP27抗原检测，阳性者都全部淘汰。 优点：方法简单，成本相对较低，每次可检测所有个体样品。 方案B 基本原则：根据泄殖腔棉拭子及蛋清中gsP27抗原检测，阳性者都全部淘汰。 优点：方法简单，成本相对较低，每次可检测所有个体样品。 缺点：不能区别内源性E亚群ALV将会把感染了内源性E群但外源性ALV阴性鸡也淘了。但是当阳性率高时，对选种不利，很难被育种专家接受。另一方面，单靠泄殖腔棉拭子及蛋清中gsP27抗原检测，其灵敏度尚不足以检测出所有感染鸡。因此，只能保持鸡群相对较高的洁净度，但不能完全净化。因而，检测和净化过程需不断进行。 适应情况：当整个后备鸡群p27阳性率在20%以下或在育种专家可接受全部淘汰的范围内时，可采取这一方法。具体程序：母鸡和公鸡：（1）18～20W 棉拭子检测p27；（2）21～22W 棉拭子检测p27，如人工授精，最初次2要同时检测公母鸡；（3）23～25W （开产初期）棉拭子检测最初第1～3个，蛋的蛋清中p27；（4）~40W（准备孵化留种时），公母鸡棉拭子检测p27，母鸡 2个蛋的蛋清检测p27；（5）．~43W 孵出小鸡，对每只后备母鸡最初孵出的二只小鸡，胎粪棉拭子检测p27。 |
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