抗生素类兽药残留检测技术
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1．技术简介 抗生素是微生物在代谢过程中的一种对其他微生物具有杀灭或抑制作用的次级代谢产物。抗生素的发现使人类掌握了治疗感染性疾病的有力武器，抗生素在兽医和畜牧业生产中均有大量应用，临床诊断用于呼吸系统、消化系统和生殖系统感染的治疗，大部分抗生素作为兽药添加剂用于动物疾病预防、降低死亡率和促生长。但抗生素存在耐药性、过敏和稳定性等问题，对人有毒害作用，因此是各国兽药残留监控的重要内容。 抗生素种类很多，目前发现的有上千种，常见的抗生素主要包括以下几大类： （1）β-内酰胺类：包括青霉素类、头孢氨苄（先锋霉素IV）、头孢噻肟等。 （2）氨基糖苷类：包括链霉素、卡那霉素、庆大霉素、新霉素、壮观霉素等。 （3）四环素类：包括四环素、金霉素、土霉素、强力霉素等。 （4）氯霉素类：包括氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素。 （5）大环内酯类：包括红霉素、泰乐菌素、替米卡星、北里霉素。 （6）林可胺类：包括林可霉素（洁霉素）、氯洁霉素。 （7）多肽类：包括杆菌泰、粘杆菌素、维吉尼霉素。 （8）多烯类：制霉菌素、两性霉素B。 由于抗生素种类繁多，化学性质不同，因此检测方法也千差万别，但总归可以归为两类：化学测定法和免疫测定法。下面将进一步介绍基本的测定步骤。 2．应用条件 抗生素残留检测属复杂的痕量组分分析技术，多数残留水平为1ug/Kg~1mg/Kg，对检测条件及仪器设备要求都极高，从事此项工作的机构一般都配有气相色谱、液相色谱、质谱以及灵敏度更高的多级质谱，这些仪器的价格都非常昂贵。实验室环境要好，避免与外界环境间的交叉污染。检验人员要有较高的素质，有深厚的现代化学背景知识，实验技能强，具有分析问题和解决问题的能力。这些都是从事检测工作所必需的。 3．操作规程 抗生素残留分析的目的是了解待测组分的种类（定性）和浓度（定量）。生物样品中含有大量性质未知的组分，以无法预料的方式影响分析过程，分离和检测是一个残留分析方法的两个基本组成部分。 （1）分离 一般根据待测物样品基质的性质差异，利用组合的分离步骤（多维分离）可以达到分离和分析目的要求。多数分析方法中至少采用个分离步骤：1个提取步骤（将待测物从样品中释放进入溶液状态）；1~3个净化步骤（除去部分干扰杂质）；1个分离步骤，或称分辨，指借助仪器进行连续在线分离的过程。 色谱是最重要的分离技术。这种由固定相和流动相组成的分离体系可供选择的分离机制很多，几乎能够利用待测物所有常见的理化性质，如极性/非极性、溶解性、酸碱性、分子量大小等。 （2）检测 直接对痕量残留物质进行定性或定量分析的方法，主要利用待测物分子的整体性质，如紫外/可见（UV/Vis）、红外（IR）、荧光（Fluor）、核磁共振（NMR）、质谱（MS）等波谱学性质。另外，待测物浓缩和衍生化也是常用的提高检测灵敏度的方法。 |