副猪嗜血杆菌病又称革拉泽氏病,是由副嗜血杆菌(HPS)感染引起的一种以纤维素性浆膜炎、多发性关节炎和脑膜炎为特征的传染病。该病目前在规模化猪场多见,且主要危害5~8周龄的仔猪,发病率通常在10%~15%,严重时死亡率可达30%以上,特别是随着养猪业规模化、集约化的发展,猪场饲养密度越来越大,该病在各个规模化猪场不断发生和传播,被认为是“猪高热病”的凶手之一,成为近期影响我国养猪生产的典型细菌性疾病。 2008年8月,笔者曾在某规模化养猪场发现一种主要以保育猪体温升高(40.5℃~42℃),精神沉郁,呼吸困难,厌食,咳嗽气喘,腹股沟淋巴结高度重大,下痢,关节肿胀,跛行,身体震颤,共济失调,眼睑水肿,病程达3~5 d死亡为特征的病例。经流行病学调查、临床观察和实验室检测,确诊为一起副猪嗜血杆菌病病例。37头患病仔猪经过5 d全力救治,除4头重症死掉,其它基本痊愈。具体报告如下。 (一)发病情况 该规模化猪场存栏种猪280余头,商品猪1700头,主要是自繁自养生产模式,种猪未接种过副猪嗜血杆菌疫苗。哺乳仔猪免疫接种程序是:1日龄猪瘟弱毒(细胞源)冻干苗肌注1头份;7日龄猪气喘病灭活苗胸腔注射1头份;14日龄仔猪水肿病多价灭活苗肌注2 ml;23日龄猪气喘病加强免疫2头份;25日龄猪瘟二免肌注2头份。仔猪28日龄时从产房转到保育间,教槽料中加入80%支原净0.125 g/kg、土霉素0.6 g/kg。保育间每天冲洗,猪舍潮湿。据保育间工作人员介绍,仔猪待保育间7 d后个别发病:起初咳嗽、发烧,采食下降,耳尖发绀;连续注射氨苄青霉素、复方氨基比林和柴胡3 d未见明显效果,近尔部分患病猪出现明显消瘦、衰竭和严重呼吸困难等症状,直至个别死亡。 (二)病理剖检 选取将至死亡的病猪进行剖检。剖检可见皮下肌肉呈粉红色,胸腹腔、心包内有大量积液,内有纤维素性渗出物,胸腔内的脏器粘连;肺脏肿胀,出血,间质增宽,纤维素性物质使肺组织和胸膜、膈肌发生粘连,呈明显胸膜肺炎病变;腹腔内有大量积液或胶冻样物质与内脏器官粘连,跗关节和腕关节内有大量浆液性纤维蛋白渗出物;肝、肾、脑等脏器有不同程度出血、淤血和坏死;全身淋巴结肿大、出血。 (三)实验室检测 1.直接涂片镜检。分别无菌采集病仔猪肺脏、胸腹腔积液、浆膜表面物质、渗出的脑脊髓液,带回实验室进行检测,进行涂片或触片,革兰氏染色镜检,均见到革兰氏阴性的细小杆菌或球杆菌,以纤细杆状居多,个别两极染色的球杆状,间有长而弯细状菌体。 2.细菌分离培养。将上述采集到的组织,划线接种于普通营养琼脂培养基平板、胰大豆琼脂培养基(TSA)平板以及含烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)鲜血琼脂平板上37℃培养24h后,发现该菌不能再普通琼脂平板上生长,TSA培养基平板上长出针尖大小、无色透明、光滑湿润的细小菌落,在含NAD鲜血琼脂平板上成露珠状、透明菌落、无溶血现象。取TSA培养基平板上菌落抹片革兰氏染色镜检呈阴性小球杆菌。 3.生化试验。取分离菌株的纯培养物分别接种于添加有0.07%NAD微量生化鉴定管中,置于CO2培养箱中37℃培 养24 h,可见蔗糖、乳糖、葡萄糖、麦芽糖、甘露糖、山梨醇、靛基质、过氧化氢酶生化反应均呈阴性,硝酸盐还原试验阳性,结果符合副猪嗜血杆菌生化特性。 4.鉴别诊断。由猪败血性感染的细菌:链球菌(SS)、丹毒丝菌、放线杆菌(APP)、猪霍乱沙门氏菌及猪鼻支原体(MHP)引发浆膜炎和关节炎能出现与副猪嗜血杆菌(HPS)感染相似。临床上,不同细菌性疾病的病变、发病日龄以及革兰氏染色鉴别,在生产实践中意义重大。 表1 不同细菌性疾病的鉴别诊断 病原体 高发时间 脑膜炎 胸膜炎 肺炎 腹膜炎 关节炎 革兰氏染色 | 副猪嗜血杆菌 5~8周 + + + + + G - 链球菌Ⅱ型 断奶至6个月 + - - - + G + 链球菌Ⅰ型 2~4周 + - + - + G + 丹毒丝菌 3个月以上 - - - - + G + 放线杆菌 6~10周 - + - - G - 猪霍乱沙门氏菌 2~4周 - - - - - G - 猪鼻支原体 3~10周 - + + + + G - |
备注:“+”表示病原体感染发病后会产生此病变;“-”表示不会产生此病变 G +镜检呈紫色,G -镜检呈红色 根据对该猪场进行流行病学调查、临床观察、病理剖检以及实验室检测等综合判定,该场此起病例为副猪嗜血杆菌感染。
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