预防兽医
鸡大肠杆菌病自家苗的制造及使用
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近年来，鸡大肠杆菌病已成为危害养鸡业的主要疾病之一。有效防制方法主要为抗生素防治和疫苗预防。由于大肠杆菌易产生抗药性，使药物防治效果不佳，费用增加。更严重的是会产生严重的药物残留，影响食品安全。由于致病性大肠杆菌的血清型众多，且各地各场的血清型不尽相同，因此没有一种标准化的疫苗供全国各地使用。用鸡场分离的菌株制备自场苗已成为预防本病的最有效途径，鸡群发生大肠杆菌病时，如能紧急注射有效疫苗则能很快控制疫情。在生产中为了能尽快控制疫病，减少损失，需要及早注射自场疫苗。按传统程序制备菌苗耗时很长，鸡群因不能及时免疫而使疫情扩大。经多年实践，摸索出一种快速简易制苗法，制备的菌苗免疫效果好，能较快控制疫病。 1 制苗菌株的分离鉴定 1.1 病料采集 选择具有典型大肠杆菌病变的病死鸡的肝组织作为接种材料，按发病鸡群数的2%采集病料。 1.2 细菌分离鉴定 将采集的病料分别接种于麦康凯琼脂，培养24小时后每份病料选择1～2个红色菌落接种于普通营养琼脂进行纯培养，对纯培养的各菌株进行生化试验，符合大肠杆菌特性的菌株留做制苗菌株。 2 制苗过程 2.1 种子菌液的培养 制备普通营养肉汤，按所制菌苗的10%培养种子菌液。种子菌液可按菌株数分为若干份进行培养，如株菌较多时，每份种子菌液里可接种多株菌种。37℃培养24小时后备用。 2.2 制苗菌液的培养 将培养好的种子菌液混合加入制苗用营养肉汤，37℃震荡培养24小时后，进行纯检及细菌计数，发现有杂菌污染的废弃，纯培养的菌数应达100亿/毫升。 2.3 灭活 向菌液里加入0.4%的甲醛溶液，37℃培养48小时，每隔2小时摇荡一次。 2.4 无菌检验 取灭活后的菌液接种于普通营养琼脂，37℃培养24小时，应无任何细菌生长。 2.5 加入佐剂 按5﹕1的比例在灭活菌液里加入30%铝胶盐水，充分摇匀。 2.6 分装 将制好的菌苗分装于灭菌瓶内，4℃冰箱保存。 3 使用方法 1月龄以下0.5ml/只，1月龄以上1ml/只，皮下或肌肉注射。注射前要对注射针具彻底消毒，疫苗要彻底摇匀，注射时要勤换针头。注射完疫苗后，有的鸡群略显安静，采食饮水略有下降，1天左右完全恢复。 4 使用效果 经过对15批5万多只发病鸡的防制试验表明：使用以上方法制备的自场苗对大肠杆菌病具有非常好的防制效果。在鸡群发病时，使用疫苗1周后发病明显减少，10～15天疫情完全消除，未见复发情况。用自场苗对未发病鸡群免疫接种可以防止疫病的发生。 5 讨论和小结 鸡群发生大肠杆菌病时，用药物防制虽能取得一定效果，但疫病易反复发作，如能及早注射有效疫苗则能很快控制疫情。为了尽快制造出自场疫苗，使大肠杆菌病得到及时控制，上述方法中省略了细菌的血清型鉴定、致病性鉴定和免疫效力检验，直接采取发病鸡2%的典型病料分离细菌，用分离出的菌株混合制成灭活菌苗。经过对15批5万多只发病鸡的防制试验表明，用这种方法制备的菌苗免疫效果良好。通过疫病控制后对病原菌进一步的研究证实：采取多份病料分离病原可以避免未做血清型鉴定而使制苗菌株偏少的情况发生，采取典型病变的病料分离的细菌则绝大多数为致病菌。 用上述方法制苗可以缩短制造时间，如条件具备，各种准备充分，则1周内即可制造出灭活菌苗。使用这种菌苗可以使疫病得到及时有效的控制，可以避免疫病反复发作，可以节省药物开支，减少药物残留，在养鸡生产中具有重要的现实意义。 |
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