四、蛋白质的沉淀和凝固 蛋白质胶体溶液的稳定性与它的分子量大小、所带的电荷和水化作用有关。 改变溶液的条件,将影响蛋白质的溶解性质。在适当的条件下,蛋白质能够从溶液中沉淀出来。 1.盐析:加入大量中性盐可使蛋白质从水溶液中沉淀析出 。 2.重金属盐沉淀蛋白质:重金属离子可与蛋白质结合成盐而沉淀。 3.酸类沉淀蛋白质:三氯醋酸等可与蛋白质正离子结合成不溶性盐而沉淀。 4.有机溶剂沉淀蛋白质:乙醇等能破坏蛋白质的胶体性质,使蛋白质析出沉淀。 5.加热凝固:加热可使蛋白质变性,使蛋白质凝聚成凝块。 五、蛋白质的颜色反映 1.双缩脲反应: 蛋白质与碱性硫酸铜作用,生成紫红色的复合物。 2.酚试剂反应; 在碱性条件下,蛋白质分子中酪氨酸、色氨酸等残基使酚试剂还原,显蓝色。 3.考马斯亮蓝G-250: 本身为红色,与蛋白质反应呈蓝色 4 蛋白质的紫外吸收特性:蛋白质中含有芳香族氨基酸在280nm内有特异的吸收光谱。 第三单元 核酸 第一节 核酸的化学组成 核酸是一类重要的生物大分子,担负着生命信息的储存与传递,有脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两大类。DNA主要存在细胞核内,RNA则分布在胞液。RNA依据其功能分为三类:信使RNA(mRNA)、转运RNA(tRNA)和核糖体RNA(rRNA)。 一、核酸的化学组成 核酸完全水解产生嘌呤和嘧啶等碱性物质、戊糖(核糖或脱氧核糖)和磷酸的混合物。核酸部分水解则产生核苷和核苷酸。每个核苷分子含一分子碱基和一分子戊糖,一分子核苷酸部分水解后除产生核苷外,还有一分子磷酸。核酸的各种水解产物可用层析或电泳等方法分离鉴定。 (一)碱基:核酸中的碱基主要有嘌呤和嘧啶两类。DNA有A、T、G、C四种碱基;RNA中有A、U、G、C四种碱基。 1.常见碱基: 腺嘌呤(A) , 鸟嘌呤(G),尿嘧啶(U ),胞嘧啶(C),胸腺嘧啶(T) 2.稀有碱基:常见的有7-甲基鸟嘌呤、5-甲基胞嘧啶,5、6-二氢尿嘧啶等。 (二)、核糖:核酸属于戊糖,有两种。DNA所含的糖为2`-脱氧核糖;RNA所含的糖则为核糖。 (三)核苷:由一个戊糖和一个碱基缩合而成。 (四)核苷酸:是构成核酸的基本结构单位。 核苷酸是由核苷戊糖上的羟基与磷酸酯化而成,包括核糖核苷酸和脱氧核苷酸。 环化一磷酸腺苷(cAMP),环化一磷酸鸟苷(cGMP)不是核酸的组成成分,而是重要的调节物质,在细胞中的浓度很低,但作为激素的第二信使,在物质代谢中发挥重要的作用。 三 核酸的结构 (一)核酸的一级结构 核酸分子中核苷酸的连接方式为一个核苷酸戊糖3’碳上的羟基与下一个核苷酸戊糖5’碳上的磷酸脱水缩合成酯键,此键称3’,5’磷酸二酯键。许多核苷酸通过3’,5’磷酸二酯键连接成长的多核苷酸链,称多核苷酸,即核酸。在DNA分子中A=T,G=C,比值接近为1,称为碱基当量定律,是提出DNA分子结构模型的基础。 |
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