兽医考试
动物疫病防治技术部分试题之二
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164、何谓培养基？ 答：培养基是人工给细菌制备的营养品和居住的基地，细菌可在其中进行生命活动。 165、何谓细菌的培养特性和纯培养？ 答：培养特性是指细菌在培养基上的生长表现。它包括细菌生长的要求（如营养和氧气等）和生长特点（如在肉汤中的浑浊度，在平板上的菌落形态、大小、透明度等）。纯培养是指用单个菌落进行大量繁殖的培养。其后代是纯一的细菌，供细菌鉴定和菌种保存之用。 166、细菌生长、繁殖的基本条件是什么？ 答：基本条件是有足够的营养，适当的氧气，适宜的酸碱度（PH值）和温度，足够的生长因子。 167、如何制造普通琼脂培养基、肉汤培养基？ 答：（1）普通肉汤培养基：取牛肉浸膏0.3-0.5g、氯化钠0.5g蛋白胨1g、磷酸氢二钾0.2g、蒸馏水100ml，加热溶解，调整PH至7.4-7.6,滤纸过滤分装,15磅高压蒸汽灭菌20-30分钟，经无菌检验后备用。 （2）普通琼脂培养基：牛肉浸膏0.3-0.5g、蛋白胨1g、氯化钠0.5g、琼脂2-3g、蒸馏水100ml、放入容器中，流通蒸汽锅内加热至完全溶解，调整PH至7.6-7.8、再加热30分钟分装试管或三角烧瓶中，15磅高压灭菌20-30分钟，可制成斜面、平板、或高层，经无菌检验后用。 184、简述ELISA技术操作程序？ 答：以间接法为例。（1）抗原包被：用缓冲液将抗原稀释成最适宜浓度，然后加在聚苯乙烯板孔中，每孔200nl，4℃过夜。 （2）洗涤：倾去孔内抗原溶液，再用洗涤液加满各孔，室温放置3分钟，倒掉，如此重复3次。（3）加待检血清：将待检血清作适当稀释，加入孔中，每孔200nl，各设一孔阳性血清和阴性血清对照，37℃孵育2小时。（4）洗涤同第2条。（5）加酶标记抗体，每孔200nl，37℃孵2小时。（6）洗涤同第2条。（7）加底物：每孔加入200nl新鲜配制的底物溶物37℃，反应15-30分钟。（8）终止反应：每加2MH2SO４50微升。（9）结果判定。 185、何谓血液寄生虫的厚血膜检查法？ 答：常用于微丝蚴检查。采血2-3滴置载玻片，以另一载玻片之角涂布成较厚的血膜，自然干燥，浸入蒸馏水中，待其完全溶血后镜检；或凉干、固定、染色后镜检。 186、何谓寄生虫的薄血膜检查法？ 答：采血一滴，滴于载玻片一端，按常规推成血片，待干，滴甲醇数滴固定后，以姬姆萨或瑞氏液染色后镜检。查微丝蚴用低倍，查原虫用高倍或油镜。 187、如何制备1%鸡红细胞？ 答：至少采集3只SPF健康公鸡的血液与等体积阿氏混合，用PH7.2、0.01mol/LPBS液洗涤3次,每次均以1000r/min离心10min,洗涤后用PBS液配成体积分数为1%红细胞悬液,4℃保存备用. 188、确诊马传贫的主要方法是什么？ 答：确诊马传贫的主要方法：依据临床综合诊断，琼脂扩散试验和补体结合反应相结合方法，其中任何一种方法检测阳性，都判定为马传贫病马。 学和生物学检查只在必要时进行。 189、病理采样前使用器械如何消毒？ 答：刀、剪了、镊子等用具煮沸消毒30分钟，使用前用酒精擦拭，用时进行火焰消毒。器皿（玻制、陶制）经103Kpa高压30分钟或经160℃干烤灭菌2小时；或放于0.5%-1%的碳酸氢钠（NaHCO3）水中煮沸10分钟-15分钟。水洗后，再用清洁纱布擦干，保存于酒精、 等溶液中备用。注射器和针头放于清洁水中煮沸30分钟。一般要求使用一次性针头和注射器。采过病料的用具应先消毒后清洗。 190、如何配制25-50%甘油盐水缓冲液？ 答：纯甘油25-50ml、氯化钠4.2g、磷酸二氢钾1g、磷酸氢二钾3.1g、0.02%酚红1.5ml、蒸馏水加至100ml。加热溶化，校正PH值为7.6，100Kpa15分钟灭菌，冰箱保存备用。 191、简述猪附红细胞体的实验室检查法？ 答：（1）鲜血压滴标本镜检法：取病猪耳静脉血1滴于洁净载玻片上然后滴加2倍量生理盐水稀释混合，加洁净盖玻片，在400倍镜下观察。 （2）鲜血片染色镜检法：取病猪耳静脉血少量于洁净玻片→推片→甲醇固定→姬姆萨染色→水洗，干后显微镜下（1000倍油镜）观察。 192、简述弓浆虫病待检样品的采集及处理？ 答：无菌采取病畜的脑组织、心、肝、肺、肾、骨骼肌各2克，以及3毫升腹腔液，所取组织或器官材料分别放入乳钵中，加无菌砂子和0.8%无菌盐水进行研磨。用0.8%盐水配制成10%-20%组织悬液，肺和肌肉悬液加蛋白酶消化后的组织悬液用于接种，腹腔液不用处理可直接接种。 193、简述弓浆虫的分离鉴定与判定？ 答：（1）操作方法接种。选27只健康小白鼠分为9组，每组3只，作如下处理：空白对照（1组）不作任何处理。生理盐水接种组（1组），每只小白鼠腹腔接种生理盐水1毫升。病料接种组（共7组），每只分别腹腔接种组织悬液1毫升。 |
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